基因调控网络：解码生命的交响乐

2025-02-08 摘要：基因调控网络（GRNs）是控制基因表达的复杂系统，决定了细胞的身份、功能和命运。理解GRNs对于揭示发育、疾病和进化的奥秘至关重要。本文将深入探讨GRNs的组成、动态特性、分析方法及其在生物学中的应用。关键词：基因调控网络，基因表达，转录因子，顺式调控元件，系统生物学1.引言生命体由数以万计的基因组成，但并非所有基因在所有时间都处于活跃状态。基因调控网络（GRNs）就像指挥家，精确地控制着基因的表达时间和水平，从而协调细胞的活动，构建出复杂的生命体。2.GRNs的组成G...

为何酶不能保存在-80°C冰箱？

2025-02-07 生物实验室的宝子们，平时做PCR实验，一定离不开各种酶的使用，而酶一般都保存在-20°C的冰箱中。实验室除了-20℃冰箱，肯定都还有-80℃的冰箱，那为什么我们要选择-20℃，而不选择温度更低的-80°C的呢?大家有思考过这个问题吗?酶在-80°C下保存是为了维持其活性和稳定性，但并非所有酶都需要如此低温保存。以下是专业解读：1.酶的特性温度敏感性：酶是蛋白质，高温易导致变性，低温则能减缓降解和变性速度。长期保存需求：-80°C能有效抑制酶活性中心的破坏和蛋白水解酶的降解。2...

悬浮细胞的转染

2025-02-06 一、悬浮细胞都有什么？悬浮生长的细胞是指在体外培养时不依赖于支持物表面，而是在培养液中以悬浮状态生长的细胞。这类细胞通常来源于血液、淋巴组织，例如某些肿瘤细胞和转化细胞。悬浮细胞的特点是细胞呈圆形，一般不贴于支持物上，易于大量繁殖。在体外培养的细胞类型中，悬浮细胞可以呈单个细胞或细小的细胞团生长。以下是一些常见的悬浮生长细胞类型：小鼠腹水瘤S180小鼠骨髓瘤NS1和SP2/0人造血系肿瘤细胞U937、HL60、K562人原髓细胞白血病细胞HL-60小鼠白血病细胞WEHI-3人...

慢病毒转染贴壁细胞全流程详解

2025-02-06 慢病毒转染贴壁细胞全流程详解一、细胞种板将细胞种在12孔板中，每孔1.5×10^5个细胞。每孔加入1mlwan全培养基。二、病毒感染1.待细胞生长至30%～50%时开始转染。2.将病毒从冰箱取出，放在冰上融化。3.打开生物安全柜，关闭风机，戴好帽子和口罩。4.弃去培养基，用PBS洗三次。5.每孔加入500ulwan全培养基。6.根据公式计算每孔所需病毒量：每孔病毒量（μL）=MOIx细胞数/病毒滴度（TU/mL）×1000。7.4小时后，再向孔板中加入500ulwan全培养基...

小分子蛋白的WB该如何？

2025-01-23 WB（WesternBlot）是一种常用的生物化学实验技术，用于检测和分析蛋白样品中特定蛋白质的存在和表达水平。它通过将样品中的蛋白质分离并转移到膜上，然后使用特定的抗体识别目标蛋白，并通过化学或免疫检测方法来可视化这些蛋白质。WesternBlot技术通常包括样品制备、SDS-PAGE电泳分离、蛋白转印、封闭和抗体检测、曝光显影等步骤。目前WB被广泛应用于生物医学研究中，用于研究蛋白质表达、翻译后修饰以及蛋白质相互作用等。图1.WB流程图在日常实验过程中，小分子蛋白是非常常...

明明冻存的时候细胞长得好好的，怎么一复苏就完啦？

2025-01-21 不知道大家是否会遇到细胞冻存的时候状态非常不错，结果等到需要用到该细胞的时候怎么也复苏不起来的情况啊？或许可能是冻存细胞的时候出现了什么差错？一.细胞冻存的原则：慢冻，细胞在冷冻过程中，如果降温过快，会形成大的冰晶，这些冰晶会破坏细胞结构，导致细胞死亡。详细版本见《细胞冻存的原理是什么？》二.冻存液的配置：常用配置比例：培养基:血清:DMSO=7:2:1适用于大多数细胞系，能够保证细胞在冻存过程中有较高的存活率。血清:DMSO=9:1适用范围：适用于需要长时间保存或者具有特别...

CCK8实验注意事项

2025-01-20 CellCountingKit-8（简称CCK-8）试剂可用于简便而准确的进行细胞增殖和毒性分析。基本原理：该试剂中含有WST-8【化学名：2-(2-甲氧基-4-硝基苯基)-3-(4-硝基苯基)-5-(2,4-二磺酸苯)-2H-四唑单钠盐】，它在电子载体1-甲氧基-5-甲基吩嗪鎓liu酸2甲酯（1-MethoxyPMS）的作用下被细胞中的脱氢酶还原为具有高度水溶性的黄色甲瓒产物（Formazandye）。生成的甲瓒物的数量与活细胞的数量成正比。因此可利用这一特性直接进行细胞增...

CCK8实验一文就懂！

2025-01-20 前面我们在文章《为什么CCK8镜下趋势是对的，测出来的OD值却不对？？》中cue到过CCK8实验，那么CCK8具体到底是什么呢，让我们今天一起详细了解下吧~一、CCK-8实验的基本定义与原理CCK-8实验是一种广泛应用于细胞生物学研究的细胞增殖和毒性检测方法。其基本原理在于利用细胞内的代谢酶将无色的CCK-8试剂（CellCountingKit-8）中的WST-8（2-(2-甲氧基-4-硝基苯基)-3-(4-硝基苯基)-5-(2，4-二磺酸苯)-2H-四唑单钠盐）还原为具有高...