双荧光素酶实验的注意事项有哪些？

2024-01-09 双萤光素酶报告基因通常以萤火虫萤光素酶为报告基因，以海肾萤光素酶为内参基因，如此所构成的报告系统有检测灵敏度高、动态范围广、内参平衡等优势，因此在实验中得到广泛应用。那么你知道双荧光素酶实验的注意事项有哪些吗？让我们一起来看看吧！一、荧光值过高荧光值过高可能会超出仪器检测范围，从而检测不到值，一般读数在5-6位之间较好。荧光值过高可通过以下方式尝试解决：1.减少质粒转染量；2.细胞样品裂解后，离心取上清后检测或对裂解产物进行稀释后检测。（注：不建议通过减少底物量来降低荧光值，...

你知道什么是双荧光素酶实验吗？

2024-01-09 在基因表达调控的研究中，报告基因广泛应用，如荧光蛋白、真核抗性和荧光素酶等。在一些临床医学或基础医学文章中，双荧光素酶结合验证实验部分是多数机制研究bi备的实验部分，例如：在通路研究中，尤其涉及到miRNA与功能基因的相互作用时，双萤光素酶报告基因检测实验是bi备的实验要点。那么你知道到底什么是双荧光素酶实验吗？让我们一起来看看吧！萤光素酶（Luciferase）是自然界中能够产生生物萤光的酶的总称，其中应用较为广泛的是萤火虫萤光素酶（Fireflyluciferase）和海...

Alzet渗透泵在动物实验中的操作流程

2024-01-08 渗透泵是一种常用于动物实验的工具，用于持续、精确地给予动物药物或其他溶液。Alzet渗透泵已用于数千项关于控制输送各种实验剂（包括肽、生长因子、细胞因子、化疗药物、成瘾药物、激素、类固醇和抗体）影响的研究。由于Alzet渗透泵的du特运行机制，任何分子构象的化合物都可以以可控的速率以可预测的速度输送，而不受其物理和化学性质的影响。那么你知道Alzet渗透泵在动物实验中的操作流程吗？让我们一起来看看吧！一、准备工作：1.检查Alzet泵的有效期，确保其在使用期限内。2.准备所需...

你了解胎牛血清的储存条件吗？

2024-01-08 zhong所周知，胎牛血清是细胞培养实验中的一把“好手”，在细胞的茁壮成长过程中起到十分关键的作用，比如胎牛血清里存在粘附因子、生长因子、激素、脂质、铺展因子、糖类、转运蛋白、维生素等有益于细胞生长，进行标准的胎牛血清存储操作对于其发挥作用十分重要，那么你了解胎牛血清的储存条件吗？以下是一般建议的胎牛血清储存条件：1.温度：胎牛血清应储存在-20℃或更低的温度下。冷冻储存可以延长胎牛血清的保质期。2.避光：胎牛血清容器应避免直接暴露于光线中，因为光照可能会降解其中的成分。可以...

保存蛋白质的原则及方法有哪些？

2024-01-08 在完成蛋白质纯化后，如果保存不当，容易发生失活和变性的情况，那么你知道保存蛋白质的原则及方法有哪些吗？让我们一起来看看吧！一、原则1.低温保存蛋白质时，确保在低温条件下至关重要。低温意味着较低的能量水平，有助于减缓蛋白质分子内部的热运动，减少键的断裂可能性。此外，在低温下，微生物繁殖减缓，潜在的蛋白酶活性降低，从而有助于维持蛋白质的活性。2.无菌在进行蛋白质实验操作时，务必佩戴手套。尽管实验室戴手套通常是为了保护实验者自身，但在生化实验中，蛋白质是我们需要保护的主体。我们皮肤...

免疫共沉淀实验的原理是什么？有何注意事项？

2024-01-08 免疫共沉淀（Co-Immunoprecipitation，CoIP）是一种常用的分子生物学实验技术，用于研究蛋白质间的相互作用及其与其他分子的结合。该实验通过将抗体与特定蛋白质结合，然后利用这种结合来沉淀目标蛋白质和与其相互作用的分子。那么你知道免疫共沉淀实验的原理是什么吗？有何注意事项？让我们一起来看看吧！一、基本原理：首先在非变性条件下使用温和的细胞裂解液裂解细胞，此时存在于完整细胞内的蛋白质与蛋白质之间的相互作用被保留了下来。随后向细胞裂解液中加入偶联某种抗体的琼脂糖珠...

胎牛血清在细胞培养中有什么用？

2024-01-05 胎牛血清是一种常用的细胞培养基添加剂，可以提供细胞生长和增殖所需的营养物质、生长因子和激素等。胎牛血清由新生牛犊提取，含有丰富的蛋白质、氨基酸、维生素和矿物质等。那么你知道胎牛血清在细胞培养中有什么用吗？让我们一起来看看吧！一、作为细胞培养基组分胎牛血清通常作为细胞培养基的添加剂，用于提供细胞生长和增殖所需的营养物质、生长因子和激素等。具体来说，胎牛血清中含有以下主要组分：1.蛋白质：胎牛血清是一种富含蛋白质的添加剂，其中包含多种不同种类的蛋白质，如血清白蛋白、球蛋白、免疫球...

如何选择合适的流式抗体？

2024-01-05 由于在流式细胞实验过程中，荧光抗体对单细胞悬液的标记效果直接影响实验的数据质量。因此，需要考虑各种影响流式抗体品质及检测效果的因素，例如抗体特异性、荧光素信号强弱、荧光素标记方式、同型对照等。那么你知道我们该如何选择合适的流式抗体吗？让我们一起来看看吧！流式抗体本身也是抗体，所以选择流式抗体一定要满足抗体选择最基本的条件：目标蛋白特异性，反应种属以及应用实验。流式抗体荧光标记的方式包括直接标记和间接标记两种。在流式实验过程中，尽量减少实验工序和过程，以保证实验的真实和准确性。...